羧肽酶酶制劑商品供應(yīng)主要來(lái)源于豬胰腺，但 價(jià)格昂貴。因此，利用微生物獲得大量的羧肽酶，具有 重要的現(xiàn)實(shí)意義。黑曲霉（Aspergillus niger）是國(guó)際上公 認(rèn)的安全發(fā)酵微生物，且適合采用固態(tài)發(fā)酵的方式，而 黑曲霉生產(chǎn)羧肽酶發(fā)酵工藝條件鮮見(jiàn)報(bào)道。是在 前期篩選分離純化獲得的羧肽酶活力較高的黑曲霉（Aspergillus niger）H1-6的基礎(chǔ)上，利用固態(tài)發(fā)酵技術(shù)，優(yōu)化其 產(chǎn)酶發(fā)酵工藝參數(shù)，并考察發(fā)酵粗酶液在醬油釀造發(fā)酵中 的應(yīng)用效果，為實(shí)現(xiàn)羧肽酶的規(guī)模化生產(chǎn)、降低成本來(lái)滿 足商業(yè)化的需要，對(duì)推動(dòng)我國(guó)相關(guān)產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有重要意義。SW-CJ-ZFD型雙人單面凈化工作臺(tái)：蘇州凈化設(shè)備有限 公司；DHP-9162型電熱恒溫培養(yǎng)箱：上海博迅醫(yī)療生物儀器股份有限公司；722N型可見(jiàn)分光光度計(jì)：上海精密科學(xué)儀器有限公司。

    當(dāng)碳源為麩皮時(shí)，羧肽酶的固態(tài)發(fā)酵酶活 力最高（640±32）mU/g，其他依次為玉米芯粉、米糠和甘蔗 渣；當(dāng)?shù)礊槎蛊蓵r(shí)，羧肽酶的酶活力最高（703±11）mU/g， 其他依次為花生粕、玉米粉和菜籽油餅；無(wú)機(jī)鹽中的NaCl 對(duì)羧肽酶的固態(tài)發(fā)酵酶活力有正相關(guān)性，其他的K2PO3、 MgSO4、MnSO4 ·H2O、FeCl3 ·H2O和CaCl2則沒(méi)有影響；黑曲 霉接種量為1.0%時(shí)，羧肽酶的固態(tài)發(fā)酵酶活力達(dá)到最高 （746±22）mU/g；初始pH值為6.5時(shí)，羧肽酶的固態(tài)發(fā)酵酶 活力最高（773±16）mU/g；水分含量為55%時(shí)，羧肽酶的固 態(tài)發(fā)酵酶活力最高（826±23）mU/g。根據(jù)Box-Behnken 試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理（中心組合試驗(yàn)設(shè)計(jì) 原理），設(shè)計(jì)3因素5水平共20個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)的響應(yīng)面分析試驗(yàn)， 其中有14個(gè)析因點(diǎn)，6個(gè)零點(diǎn)重復(fù)，以羧肽酶酶活力（Y）為 響應(yīng)值，以估計(jì)試驗(yàn)誤差，分析黑曲霉H1-6固態(tài)發(fā)酵羧肽 酶活力的最佳條件。